永诺生物 MicroDrop-100 微滴式数字PCR系统

永诺生物 MicroDrop-100 微滴式数字PCR系统是一款基于微流控芯片的数字化PCR平台，通过将反应体系分割为数万个独立微滴，实现靶核酸的绝对定量检测。该系统凭借高灵敏度、高特异性和操作便捷性，广泛应用于肿瘤液体活检、传染病监测、基因表达分析、转基因成分检测等研究领域，为分子诊断和生命科学研究提供精准可靠的数据支持。

产品定位与核心能力

MicroDrop-100 专为需要极高灵敏度和精确绝对定量的应用场景设计。与传统qPCR相比，数字PCR不依赖标准曲线，通过泊松分布统计直接计算靶标拷贝数，从而消除扩增效率差异带来的偏差，特别适合检测低频突变、稀有转录本和痕量核酸。

结构与工作原理

系统由微滴生成模块、PCR扩增模块和微滴读取模块三部分组成。样本与试剂混合后，在微流控芯片中经过油包水乳化形成数万个均一微滴，每个微滴独立进行PCR扩增，最后通过双通道荧光检测读取每个微滴的阳性/阴性状态，结合软件算法计算绝对拷贝数。

功能特点与使用价值

• 高灵敏度：可检测单拷贝靶分子，适用于稀有突变检测和微小残留病监测。
• 绝对定量：无需标准品，直接计算靶标绝对拷贝数，结果更准确。
• 抗抑制物能力强：对PCR抑制物耐受性高，适合复杂样本（如血液、土壤、FFPE组织）。
• 操作自动化：微滴生成和读取自动化，简化手工操作步骤。
• 数据分析直观：软件自动生成散点图和直方图，直观显示微滴分布和定量结果。

适用样本与常见应用

• 核酸样本：DNA和RNA均可检测，RNA检测需反转录。
• 样本类型：血液、血浆、尿液、粪便、组织、培养细胞等。
• 肿瘤研究：ctDNA中低频突变检测、拷贝数变异分析、基因融合检测。
• 传染病监测：病毒载量测定、耐药突变筛查。
• 基因表达：单个细胞基因表达差异分析、miRNA定量。
• 食品安全：转基因成分绝对定量。

典型工作流程与操作要点

1. 样本制备：提取纯化核酸，定量稀释至合适浓度范围。
2. 体系配制：将DNA模板、数字PCR预混液、引物探针混合，总体积20 μL。
3. 微滴生成：将反应体系加入微滴生成芯片，置于设备中自动生成微滴。
4. PCR扩增：将含有微滴的芯片转移至PCR仪进行扩增。
5. 微滴读取：放入检测模块，软件自动读取荧光信号并分析。

操作注意事项：确保反应体系无气泡，微滴生成后避免剧烈晃动，PCR程序需参考试剂说明书设置退火温度和时间。

配套耗材与软件

系统使用专用的微滴生成芯片、密封垫和数字PCR预混液。耗材均有严格质量管控，确保微滴均一性和重复性。配套分析软件支持自动识别微滴、校正荧光泄漏、统计阳性微滴数，并输出绝对拷贝数浓度及置信区间。

安装环境与日常维护

• 环境要求：需放置在平坦、稳固的工作台上，环境温度15-30℃，相对湿度<80%。
• 电源要求：稳定接地电源，避免与大型设备共用线路。
• 清洁：定期清洁仪器表面和微滴检测窗口，避免灰尘积聚影响光路。
• 校准：建议定期进行光学校准，保证荧光检测准确性。
• 软件更新：按需升级分析软件，获取新功能及优化。

常见问题

1. MicroDrop-100 可以检测RNA吗？

可以，但需要先将RNA反转录为cDNA再进行数字PCR反应，后续步骤与DNA检测相同。

2. 微滴生成失败怎么办？

检查反应体系是否有气泡、芯片是否正确放入密封台、密封垫是否破损，必要时重新配置体系或更换耗材。

3. 系统支持哪些荧光通道？

标准配置为双通道（FAM和VIC），可根据需要选配更多通道，具体可选通道需提前配置。

4. 数据如何导出？

软件支持将定量结果导出为Excel或PDF格式，方便实验记录和报告撰写。

5. 系统对实验室环境有特殊要求吗？

除常规温湿度外，应避免强光直射和振动，建议放置在专用实验台，并保持仪器通风良好。