连桥生物 EB5005 胰酶溶液

连桥生物 EB5005 胰酶溶液是细胞培养实验室常用的消化试剂，常用于消化贴壁细胞和分离组织块。其配方经过优化，能够在温和条件下有效解离细胞连接，减少对细胞活力和功能的损伤。该产品以即用型液体形式提供，可直接加入培养皿或瓶中，简化实验操作流程。

工作原理

胰酶溶液含有胰蛋白酶，能够特异性水解蛋白质中的赖氨酸和精氨酸残基，从而破坏细胞与培养基底之间的黏附蛋白，使细胞从瓶壁或培养皿上脱落。该过程通常需要配合EDTA等螯合剂增强解离效果，减少细胞聚集，提高单个细胞获得率。

使用场景

• 贴壁细胞的常规传代培养，保持细胞系稳定扩增。
• 原代组织块消化，获得单细胞悬液以进行后续培养或分析。
• 细胞收获前前处理，便于后续实验如流式细胞术、Western blot等。

操作要点

1. 使用前将胰酶溶液预热至37℃，可提高消化效率。
2. 吸弃旧培养基，用PBS洗涤细胞一次，以去除血清中的胰酶抑制剂。
3. 加入适量胰酶溶液，覆盖细胞表面，放入培养箱孵育，观察细胞状态，待细胞变圆、间隙增大时，轻轻拍打或吹吸可脱落。
4. 加入含血清培养基终止消化，并轻轻吹打分散细胞，随后离心收集。

存储与稳定性

• 储存于2-8℃，开封后尽量在一个月内使用，以保持活性。
• 避免反复冻融，频繁冻融会降低酶活性。
• 使用前观察溶液状态，若出现浑浊或沉淀，建议过滤后使用。

常见问题

1. 如何选择合适的胰酶溶液规格？

根据实验规模，常规实验室常备100mL小包装用于日常传代，或500mL大包装用于频繁使用或大量样本处理，请根据使用频率和需求灵活选择。

2. 胰酶溶液能否用于消化悬浮细胞？

悬浮细胞一般不贴壁，无需胰酶消化，若需制备单细胞悬液，常使用机械分散或补充胶原酶等，具体需结合实验设计确定。

3. 使用胰酶时细胞总是消化不下来，是什么原因？

可能是胰酶温度过低、体积不足或消化时间不够，建议预热至37℃并适当延长孵育时间，但避免过度消化造成细胞损伤，同时确保培养表面清洁。

4. 胰酶溶液能否与培养基混合保存？

不可与含血清培养基混合保存，血清中含有胰蛋白酶抑制剂，会失活，应单独保存和使用。

5. 如何终止胰酶消化反应？

加入含血清培养基是最常见方法，血清中的α-1抗胰蛋白酶可及时终止反应；也可使用大豆胰蛋白酶抑制剂等专用终止液，请按实验需求选择。